Enkle trin til fremstilling af natriumcitratbuffer

Lær hvordan man fremstiller natriumcitratpuffer i seks enkle trin. Natriumcitrat eller trinatriumcitrat kan bufferopløsninger i pH-området på ca. 3 til 6. 2. Citronsyre kan også gøre jobbet.

Natriumcitratpuffer anvendes til RNA-isolering, fordi den minimerer basishydrolyse af RNA-strengene. Dette gør det til et vigtigt skridt i mRNA-rensningen under genomforskning eller til undersøgelse af transkription.

Citratbaserede buffere kan også hjælpe med påvisning af antigener i faste vævspræparater, fordi de bryder tværbindene dannet mellem antigenerne og fikseringsmediet.

Med nedenstående vejledning fremstilles en natriumcitratbuffer med pH 6. Vejledningen er ikke kun let, men også hurtig at udføre. Det tager kun 10 minutter at fuldføre disse trin.

To muligheder for at lave bufferen

Der er to måder at lave om natriumcitratbuffer. Først afgøre, om du har både citronsyre og den konjugerede base, natriumcitrat, til at arbejde med. Hvis du kun har citronsyre, er det ikke et problem. Du kan stadig lave bufferen.

På den anden side, hvis du har både syre og base, skal du oprette en stamopløsning af hver. Bland 21 g citronsyre i 1 liter destilleret vand og 29 4 gram natriumcitrat i 1 liter destilleret vand.

Hvis du kun har citronsyre, blandes 2. 1 gram i lige under 1 liter destilleret vand og fortsæt til næste trin.

Blanding af citronsyre og natriumcitratløsninger

Nu hvor du har oprettet din stamopløsning (hvis du havde både en syre og en base) eller blandet din syre i destilleret vand (hvis du ikke gjorde det), kan du fokusere på dine løsninger.

Bland 82 ml citronsyreopløsning med 18 ml natriumcitratopløsning.

Derefter blandes det samlede volumen op til lige under 1 liter med destilleret vand. Efterlad tilstrækkeligt volumen til at tillade tilsætning af natriumhydroxid (NaOH) i næste trin.

Justering af pH

Under forsigtig omrøring af opløsningen ved hjælp af en magnetisk omrører anvender 1M natriumhydroxid til justering af pH i blandingen til 6. Derefter gøres det endelige volumen af ​​opløsningen op til 1 liter med destilleret vand ved anvendelse af en volumetrisk kolbe.

Hvad du behøver at lave buffer

Det vil ikke kun tage dig meget lang tid at lave natriumcitratpufferen, du har heller ikke brug for mange materialer til det. Med citronsyre, 1M natriumhydroxid, destilleret vand og en kalibreret pH-sonde vil du være halvvejs der. Brug af natriumcitrat er valgfrit.

At lave buffer vil også kræve en 1 liters gradueret cylinder, en 1 liters volumenkolbe og tre 1 liters medieflasker. Endelig skal du have en magnetisk omrørerstang og en magnetisk omrører.

Hvis du ikke har alle disse materialer, skal du overveje at bruge laboratoriet på din skole eller på arbejdspladsen, så du behøver ikke købe dem selv. Du kan også nemt købe disse materialer online eller besøge en specialbutik i dit område.